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PhyNexus PTV 92-20-19說明書

C18 Mass Spectrometry PhyTip Columns

PhyNexus開發了一種自動化工藝，使用C18色譜柱和C4色譜柱對蛋白質/多肽進行脫鹽或“清理” ，以簡化樣品制備，進行質譜分析（一次多96個）。當使用手動移液管進行反相純化時，吸氣溶液中的背壓會給操作者帶來不便，并導致結果不一致。PhyTip色譜柱具有與自動化相輔相成的一致性，易用性和可擴展性，可實現清理。憑借蛋白質結合的高容量和多功能性，PhyNexus C18色譜柱是開發流體MALDI或LC-MS工作流程的適選擇。

由于PhyTip移液器吸頭柱的床尺寸和容量增加，C18色譜柱與其他色譜柱相比，極性和非極性分子的選擇性提高。這種較大的床尺寸將使捕獲的平衡推動到增加量的捕獲產物。當比較一些的C18的容量時，C18 PhyTip色譜柱的結合量是每毫升樹脂蛋白質量的兩倍多，同時具有相當的回收率和范圍。

C18色譜柱比C4色譜柱更具疏水性，可提供出色的靈敏度和肽的結合。中等90Å和300Å孔均可用于肽和蛋白質片段的差異選擇性。在C4和C18樹脂之間進行選擇時，主要區別在于C4由于其較短的長度和更接近極性二氧化硅基板而比C18稍微更具極性。因此，對于更多極性分子，C4樹脂的選擇性增加。

這些柱結合了多種蛋白質和多肽大小。結合能力高，較小或更極性的多肽損失較少。在普通的質譜兼容溶劑中回收樣品。此外，凝膠過濾柱可用于進行快速且*自動化的96次緩沖液脫鹽或緩沖液交換。

使用我們專有的雙流色譜 C18提示   完整的抗體結合和高終濃度。C18 PhyTip色譜柱兼容大多數8,12和96通道自動化液體處理機器人，包括  Agilent Technologies，  Beckman Coulter，  Dynamic Devices，  Perkin Elmer，  Hamilton和  Tecan。

PhyNexus開發了一種自動化工藝，使用C18PhyTip®色譜柱對蛋白質/多肽進行脫鹽或“清理”，用于質譜（MS）分析。PhyTip柱通過反相固相萃取（SPE）結合蛋白質/肽，其利用長碳鏈C18樹脂基于其疏水性捕獲和分離肽。

PhyTip色譜柱由C18樹脂組成，通過兩個薄的惰性玻璃料屏幕保留在移液器吸頭上。根據下游分析，PhyTip色譜柱可以在5μL床中使用90Å或300Å孔隙樹脂制成，并且可以處理高達200μL的溶液。PhyTip色譜柱通過雙流色譜處理肽，這是一種由控制體積和流速的液體處理器執行的來回流動的系統過程。

因此，該方法可用于清除中小規模的肽樣品（每次多96個），用于基質輔助激光解吸電離（MALDI）或電噴霧電離（ESI）質譜。自動化過程的一部分。

PhyNexus MEA個人凈化系統的樣品處理

1.樣品制備成0.1％三氟y酸（TFA）濃度

2.用100μL100％乙腈（ACN）潤濕4個循環

3.用100μL0.1％TFA平衡1個循環

4.用185μL樣品捕獲4個循環

5.用100μL0.1％TFA洗滌1個循環

6.用100μL70％ACN + 0.1％TFA洗脫4個循環

每個循環包括一次抽吸和一次排出，流速為1 mL / min。每個洗脫抽吸/排出步驟以4個增量進行，暫停5秒，而所有其他抽吸/排出步驟以8個增量進行，暫停30秒。該處理旨在模擬手動移液，同時補償背壓。密封洗脫板以防止揮發性洗脫緩沖液在處理期間蒸發，并且將溶液真空脫氣以進一步確保空氣不進入柱。

質譜PhyTip色譜柱可用于這些機器人系統。